中药治疗对老年痰湿雍盛型原发性高血压患者体内抗氧化水平的作用

李红   指导教师 吴文胜¹

¹辽宁中医药大学附属医院，辽宁省沈阳市  110032

李红，女，1977年生，山西太谷县人，汉族。2000年毕业于山西医科大学，硕士研究生。主治医师，主要从事心血管病及老年病的研究。Lihong7751@163.com

吴文胜，女，1971年生，广西壮族自治区合浦县人，汉族，1994年中国医科大学临床医学系毕业，博士，主任医师，主要从事高血压、冠心病及心肌病发病机制的研究。wwshhao@yahoo.com.cn

摘要

目的：探讨老年痰湿雍盛型原发性高血压患者体内氧化和抗氧化水平变化以及中药对其影响。方法：选取老年痰湿雍盛型原发性高血压患者48例，给予燥湿祛痰，健脾和胃之中药2周，健康对照组36例，分别测定丙二醛 (MDA)、共轭双烯（CD）、超氧化物歧化酶（Cu²⁺-Zn²⁺SOD）、磷脂氢谷胱甘肽过氧化物酶（PHGPx）活性。结果：高血压患者丙二醛 (MDA)、共轭双烯（CD）明显高于健康对照组，超氧化物歧化酶（Cu²⁺-Zn²⁺SOD）、磷脂氢谷胱甘肽过氧化物酶（PHGPx）活性低于健康对照组。服用中药2周后高血压高血压患者丙二醛 (MDA)、共轭双烯（CD）降低，磷脂氢谷胱甘肽过氧化物酶（PHGPx）活性增高。结论：老年痰湿雍盛型原发性高血压患者予燥湿祛痰，健脾和胃之中药可降低体内过氧化物水平并增强其抗氧化能力。

关键词：高血压、氧化应激，中药

Objective:To investigate the level of oxidation and anti-oxidant in vivo for the type of phlegmatic hygrosis obstruction in old age primary hypertension.to observe the effect of Chinese medicine for oxidation and anti-oxidant.

Methods:it was divided into two groups.activity of Malondialdehyde(MDA),conjugation diene(CD),superoxide dismutase（Cu2+-Zn2+SOD）,glutathione peroxidase（PHGPx） was evaluated between two groups.one group was the type of phlegmatic hygrosis obstruction in old age primary hypertension, which was given two weeks by eliminating dampness and expelling phlegm ,strengthening the spleen and stomach.the other group was health control group.

Results:hypertension group was higher than health control group in MDA and CD.hypertension group was lower than control group in （Cu2+-Zn2+SOD）and PHGPx. Two weeks After administration,the activity MDA and CD decreased, PHGPx increased in hypertension.

Conclusion:the Chinese medicine of eliminating dampness and expelling phlegm ,strengthening the spleen and stomach could be used in the type of phlegmatic hygrosis obstruction in old age primary hypertension.,which could decrease the level of peroxides and enhance anti-oxidant ability.

Key words:hypertension,oxidative stress,Chinese medicine

越来越多的实验证据表明氧化应激、氧自由基对高血压发生发展起着重要作用，尤其与高血压血管病变密切相关，高血压血管损伤是一系列心血管疾病包括脑卒中、心肌梗塞、心力衰竭和肾微血管病变的主要危险因素。

虽然大量的动物实验、基础研究的结果和临床检测的结果都表明了氧化应激在高血压病发病机制起着重要作用，并且动物实验也显示长期的抗氧化治疗对高血压有一定的治疗效果。但是临床实践中应用抗氧化药物治疗高血压病并未取得预期的治疗效果^〔1-4〕。中药在抗氧化方面可能起着一定作用。本研究探讨高血压患者体内过氧化水平及中药对高血压患者体内过氧化水平及抗氧化功能的影响。

1.资料与方法

1．1 对象 年龄﹥60岁，未经治疗的痰湿雍盛型原发性高血压患者48例(A组)，均符合2010中国高血压指南诊断标准，高血压病2级。病例筛选排除标准：瓣膜性心脏病、外周血管疾病、有临床意义的房室传导阻滞、心房颤动或其它严重的心律失常、慢性心力衰竭病史、血压≥160／110 mmHg、痛风、活动性肝病、合并感染、免疫系统疾病，肿瘤等患者除外，给予燥湿祛痰，健脾和胃之中药（半夏白术天麻汤加减）治疗2周，同期选择36名健康体检志愿者年龄﹥60岁为正常对照组（B组）。

1．2检测方法

1．2．1 细胞的处理：取空腹静脉血5 ml肝素抗凝。3000r／rain离心，分离血浆，除去自细胞和血小板。用生理盐水洗涤3遍，红细胞按Kalofoutis^〔5〕，等方法处理后，液氮保存待测。

1.2.2  磷脂氢谷胱甘肽过氧化物酶（PHGPx）活性测定:参照文献^〔5〕简述如下：PH7.6, 0 .4mmol/LT ris一HCL缓冲2501A1,0 .lm ol/LE DTA2 01d,0.lmol/LnaN3151d,10 0mol/L谷耽甘肤501A1,2. 5m ol/L还原型辅酶A100p1,20 0u/ml谷胧甘肤还原酶3川，10%TirtonX一1001 011,8m m01/1磷脂酸胆碱二亚油酸氢过氧化物和一定样品。总容量为1.Om l,37 ℃下用岛津UV一265FW自动记录分光光度计在340nm处观察光吸收下降数。

1．2．3  超氧化物歧化酶（Cu²⁺-Zn²⁺SOD）测定用邻苯三酚自氧化法，以在pH8.2，25℃条件下，325 nm处抑制邻苯三酚的自50％酶量为一个酶活性单位。

I．2．4 共轭双烯（CD）测定红细胞按Pryor等法处理，于232nm处测吸光度，由消光系数(E)计算^〔6〕。

1.2.5  硫代巴比妥酸(1BA)法测定丙二醛 (MDA)。

1.3 统计 学 处 理，全部实验数据采用均值标准差表示，两组间比较用t检验，两指标间相关性采用线性相关分析。

2结果

表1治疗前高血压组与健康对照组相比， CD、 MDA水平明显高于健康对照组。血清SOD、红细胞膜PHGPX水平明显低于健康对照组。

注；A组、B组比较： p<0．01

表2治疗后高血压组与健康对照组相比， MDA、CD水平仍高于健康对照组，血清SOD、红细胞膜PHGPX水平仍低于健康对照组，

注；A组、B组比较： p<0．05

从上表1、表2可以看出中药治疗前后MDA、CD水平明显降低（p﹤0.05），血清SOD、红细胞膜PHGPX水平明显增高（p﹤0.05）。

3讨论

近年来，对高血压病的防治不再局限于降压，而对血管保护作用，保护靶器官，防治心脑血管疾病的发生发展及终点事件的发生已成为重点。2007年Harrison对氧化应激与高血压提出了新的概念：认为氧化应激对高血压的发生发展，其相应的靶点是血管损害。血管内皮、平滑肌细胞，在一些危险因素的诱导下，激活烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADPH)氧化酶，使内皮型一氧化氮合酶解偶联,产生活性氧(一氧化氮自由基)，进一步激发更严重的硝化应激、过氧化亚硝酸,引起持续的血压升高和血管损害。

生理状态下，ROS作为信号分子调节内皮功能和血管收缩-舒张反应，以维持血管正常功能。病理情况下，ROS生物活性增加导致内皮功能紊乱，平滑肌细胞增生，脂质氧化，炎性反应等发生构成高血压血管损伤的重要因素。PHGPX是体内一种含硒的抗氧化的酶类，它能特异性地还原磷脂过氧化后的产物一磷脂胆碱氢过氧化物（PCOOH)，它可以反映体内抗氧化系统的功能状态，转基因 研 究表明，PHGPx的过表达可以保护宿主细胞避免氧化攻击和各种过氧化脂质介导的损伤^〔7〕。CD是细胞膜被过氧化后的产物，CD水平的高低可以反映细胞膜脂质过氧化程。

本研究发现高血压患者体内MDA、CD水平明显高于健康对照组，而SOD、PHGPX水平低于健康对照组表明在患者体内不仅存在过氧化物的增高，还存在抗氧化水平的降低，提示了高血压的血管病变氧化和抗氧化水平的失衡，保护性因素的减弱，可能是导致血管内皮细胞氧化损伤的机制之一是高血压血管病变的原因之一。

中医认为痰浊由脾虚所生。老年人脾胃虚弱或因饮食不节，损伤脾胃，脾虚不能运水湿，升清降浊失常，而致水湿内停、聚湿生痰，痰湿中阻，临床如动脉粥样硬化、冠心病、原发性高血压病、中风等均与其有关。近年来，对高血压病证本质的研究发现痰浊内阻型高血压有其一定的物质基础。有学者对高血压辨证分型和血液动力流变学的关系作了探讨，发现痰浊壅盛型高血压血液粘度较其它各型增高，痰浊还可导致血流缓慢，血管硬化，血液流量减少，是血管病变的主要原因之一。此外，痰浊作用于血管，还通过影响内皮细胞方能影响血压^〔8〕。本研究显示对于痰湿雍盛型原发高血压燥湿祛痰，健脾和胃之方药具有降低MDA、CD水平，升高SOD、PHGPX水平，证实此方药通过减轻过氧化，提高抗氧化能力，增强保护性因素，对血管内皮细胞功能起到的保护作用，改善了内皮功能，从而减轻靶器官损害，这为高血压治疗的靶器官保护提供了新的思路和方法。

参考文献：

〔1〕Landmesser U，Cai H，Dikalov S，et a1．Role of p47(phox)in vascu—lar oxidative stress and hypertension caused by angiotensin 11〔J〕．Hypertension。2002，40：5 1 1～5 1 5．

〔2〕Somers MJ，Mavromatis K，Galis ZS。et a1．Vascular superoxide production and vasomotor funcation in hypertension induced bydeoxy corticosterone acetate-salt[J]．Circulation，2000，101：1722～1728．

〔3〕Beswiek，RA Dorrance AM，Leite R，et a1．NADH／NADPH oxidaseand enhanced superoxide production in the mineralocorticoid hypertensiverat[J]．Hypertension，2001，38：1 107～1 1 1 1．

〔4〕Dobrian AD，Schriver SD，Prewitt RL．Role of angiotensin II andfree radicals in blood pressure regulation in a rat model of renalhypertension〔J〕．Hypertension，2001，38：361—366．

〔5〕Y ongpingB ao,S tephenJ ,C hambers,G aryW iliamson.D irectdir ect s eparation ofh ydropeorxy and hydroxy一hosphatidylcholin e d erivatives:a pplicationt ot hea ssayo fp hospholipidbydroperoxideglutathione proxidase〔J〕.AnalyticalB iochemist ry. 1 9 95,2 24:395一399

〔6〕李立．磷脂与疾病及其研究方法(M]．第1版．西宁：宁夏人民出版杜，1993：194．

〔7〕 Sun Q，Kojima H，Komurs S，et a1． Effect of selenium on humanphosrholipid hydroperoxide glutathione peroxidase expression and host cell susceptibility to lipid hydroperoxide mediated injury〔J〕．Biochem Mol Biol Int，1997：42：957—963．

〔8〕周瑕菁，宋剑南，王宇辉，等. 痰瘀同治对实验性高脂血症大鼠血管内皮的保护作用〔J〕. 中国中医基础医学杂志，1997,3（4）:26-27