韩丽红¹闫斌² 于跃利²

1 包头医学院生物化学教研室 内蒙古 包头 014040

2包头医学院第一附属医院普外二科 内蒙古 包头 014010

【摘要】目的:通过检测血清Bcl-2、血管内皮生长因子的水平，以研究其在肝癌中表达的意义。方法:选取2011年2月～2012年12月入我院经临床确诊为50例肝癌患者为观察组，50例正常者为对照组。检测两组患者血清Bcl-2、血管内皮生长因子的含量及表达阳性率，并分析比较检测结果。结果:观察组患者血清Bcl-2、血管内皮生长因子的表达阳性率均明显大于对照组（98%>20%、100%>30%），两组相比较差别具有统计学意义（P<0.05）；观察组和对照组的血清Bcl-2的水平分别为（102±40）U/L、（45±30）U/L，观察组显著高于对照组，两组相比较差别具有统计学意义（P<0.05）；观察组和对照组的血管内皮生长因子水平分别为（415.2±140.3）ng/L、（160.5±65.8）ng/L，观察组明显高于对照组，两组相比较差别具有统计学意义（P<0.05）。结论:肝癌患者的血清Bcl-2、血管内皮生长因子检出率明显高于正常者，且血清中含量多于正常者，对肝癌疾病的预后及治疗有着重要的临床意义。

关键词:肝癌；血清Bcl-2；血管内皮生长因子；凋亡；基因表达

【通讯作者】于跃利，E-mail: ybacm@163.com

【作者简介】韩丽红（1979-），女，内蒙古人，博士研究生，副教授，生物化学专业，主要从事肿瘤基因诊断方面的研究。E-mail:vhanlihong @163.com

Serum Bcl-2, vascular endothelial growth factor expression and significance in Hepatic carcinoma patients

Han Li hong¹  Yan Bin²  Yu Yue li²

1 Department of Biochemistry, Baotou Medical College 014040

2 General Surgery, The First Affiliated Hospital of Baotou Medical College   014010

OBJECTIVE  To detect serum Bcl-2, vascular endothelial growth factor levels in order to study the significance of its expression in HCC . Methods: February 2011 - December 2012 into the hospital clinically diagnosed 50 cases of liver cancer patients in the observation group, 50 cases of normal control group. Serum were detected Bcl-2, vascular endothelial growth factor levels and positive expression rate, compare and analyze the test results. Results: The serum Bcl-2, vascular endothelial growth factor expression positive rate was significantly higher than the control group ( 98% > 20% and 100 %> 30% ) , compared to the difference between the two groups was statistically significant (P <0.05 ) ; serum levels of Bcl-2 in the observation group and the control group were (102 ± 40) U / L, (45 ± 30) U / L, the observation group was significantly higher , compared to the difference between the two groups was statistically significance (P <0.05); observation group and the control group of vascular endothelial growth factor levels were (415.2 ± 140.3) ng / L, (160.5 ± 65.8) ng / L, the observation group was significantly higher, compared to the two groups the difference was statistically significant (P <0.05). Conclusion: The serum of patients with hepatocellular carcinoma Bcl-2, vascular endothelial growth factor detection rate was significantly higher than normal , and the serum levels than normal , prognosis and treatment of liver disease has important clinical significance.

Keywords: hepatic carcinoma; serum Bcl-2; vascular endothelial growth factor; apoptosis; gene expression

血清中Bcl-2是一种抑制细胞凋亡蛋白，在调节细胞凋亡过程中起着重要的作用，在正常细胞凋亡的过程中Bcl-2是被抑制的，但由于某些疾病如肿瘤则会激活Bcl-2，使其参与调节干扰细胞凋亡^[1]。血管内皮生长因子，即早期提及的血管通透因子，也是血管内皮细胞特异性的结合生长因子，因此具有诱导血管增生的作用，有力地为肿瘤细胞提供了丰富的营养^[2]。因此Bcl-2、血管内皮生长因子在恶性肿瘤疾病中起到了十分重要的作用，也越来越受到广泛的关注。为了了解Bcl-2、血管内皮生长因子的临床意义，本研究选取入我院治疗的50例肝癌患者为研究对象展开探讨。具体分析见以下报道。

1.资料与方法

1.1一般资料 选取2011年2月～2012年12月入我院经临床确诊为肝癌的患者50例，正常者50例，前者为观察组，后者为对照组。观察组患者年龄分布于（40～60）岁，平均年龄为（44±2.4）岁；男性38例，女性12例；对照组患者年龄分布于（38～61）岁，平均年龄为（42±3.6）岁；男性40例，女性10例。两组在年龄、性别等一般资料方面相比较差别无统计学意义（P>0.05），具有可比性。

1.2 方法

1.2.1血清Bcl-2测定 抽取空腹静脉血4mL，于室温下放置30min，然后于4℃、3000转/min、离心15min，取上清液放入EP管中，采用ELISA法进行测定，暂不测定时须放入-70℃中冷冻保存备用。

1.2.2 血管内皮生长因子测定 取静脉血3mL，-30℃冰箱中保存，采用ELISA血管内皮生长因子检测试剂盒，酶标仪上波段选择450nm，获得待测标本的吸光度值与标准曲线上对照从而查出血管内皮生长因子的水平。其测定原理为：用纯化的血管内皮生长因子抗体（10ug/mL）包被微孔板，洗涤后加入待测细胞培养上清液，放置室温下1小时，经彻底洗涤后加入标记的血管内皮生长因子抗体，室温下1小时后再洗涤、切割，以γ计数器测定血管内皮生长因子值。

1.3统计分析 采用SPSS 17.0统计学软件对所得数据结果进行统计学分析。计数资料采用X²检验，P<0.05表示差异有统计学意义。

2 结果

2.1 两组患者血清Bcl-2、血管内皮生长因子表达阳性率分析比较情况

观察组患者血清Bcl-2、血管内皮生长因子的表达阳性率分别为98%、100%；对照组患者血清Bcl-2、血管内皮生长因子的表达阳性率分别为20%、30%；观察组患者血清Bcl-2、血管内皮生长因子的表达阳性率均明显高于对照组，两组相比较差别具有统计学意义（P<0.05），见表1。

表1 两组患者血清Bcl-2、血管内皮生长因子的表达阳性率分析比较情况（n（%））

注 与对照组相比，*P<0.05

2.2 两组患者血清Bcl-2、血管内皮生长因子的水平分析比较情况

观察组患者者血清Bcl-2、血管内皮生长因子的水平均显著高于对照组，两组相比较差别具有统计学意义（P<0.05），详情见表2。

表2 两组患者血清Bcl-2、血管内皮生长因子的水平分析比较情况（n）

注 与对照组相比，*P<0.05

3 讨论

有报道证明，Bcl-2在调节细胞凋亡中发挥着不可忽视的作用^[3]。凋亡，是一种程序性的细胞死亡，在器官组织的发育以及维持体内环境稳定方面起着重要的作用，但细胞凋亡与某些疾病有关，如发生恶性肿瘤，恶性肿瘤细胞逃避凋亡机制，主要是由于过表达抗凋亡蛋白Bcl-2^[4]。细胞凋亡有两种途径，即线粒体调控途径和死亡受体途径。其中，线粒体调控途径：原癌基因激活、缺氧或生长因子缺乏等可导致该途径激活，在这过程中，Bcl-2被抑制，线粒体释放细胞色素C，因而引起细胞凋亡^[5]。而恶性肿瘤细胞过表达Bcl-2，Bcl-2能阻止细胞色素C从线粒体释放到细胞质，从而抑制凋亡。

血管内皮生长因子，是高度保守的二聚体糖蛋白，能直接作用于血管内皮细胞，促进血管内皮细胞增殖，从而促进血管新生；另外， 血管内皮生长因子能够诱导内皮细胞内钙离子浓度暂时性增高，引起血管通透性增加；血管通透性增加，血浆蛋白外渗，为肿瘤转移提供了基质；同时会抑制宿主抗原呈递细胞成熟，是肿瘤细胞避免免疫监测^[6]。据相关报道表明，肿瘤的生长，必须依靠新生的血管来提供充足的氧气和营养物质来维持。可见， 血管内皮生长因子对恶性肿瘤疾病的重要影响。

综上所述，肝癌患者血清Bcl-2和血管内皮生长因子水平明显高于正常者，其分子学作用机制有利于引发人们对肝癌治疗方案的研究，对肝癌患者的预后也起着十分重要的临床意义。

参考文献

[1] 李胜棉，张慧景，吴义娟，等.HBV相关及HCV相关肝细胞肝癌组织中8－羟基脱氧鸟苷酸和CD34及Ki－67的表达研究[J].中国全科医学，2011，14（5）：1669.

[2] 徐英，颜浩.恶性肿瘤雌激素受体及其拮抗剂与血管内皮生长因子关系的研究进展[J].实用心脑肺血管病杂志，2010，18（5）：683.

[3] 陶晓峰，刘畅.缺氧诱导因子1α和血管内皮生长因子与肝细胞癌分化及其侵袭性的相关性研究[J].中国全科医学，2011，14（1）：164.

[4] 董立华，李华.肝型脂肪酸结合蛋白及血管内皮生长因子在原发性肝癌中的表达以及相互关系[J].南方医科大学学报，2011，12（6）：318-321.

[5] K sem M，Tuncer I，Kotan C，et al.Significance of VEGF and microvasculardensity in gastric carcinoma[J].Hepatogastroenterology，2009，56（93）：1236－1240.

[6] 邓应彬，朱烈烈.肝细胞癌中血管内皮生长因子的表达与肿瘤进展的关系研究[J].中国全科医学，2010，13（36）：4083-4085.